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    牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的步驟有哪些?

    玻璃杯

    牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用十分廣泛的天然培養(yǎng)基,其中的牛肉膏為微生物提供碳源、磷酸鹽和維生素,蛋白胨主要提供氮源和維生素,NaCl提供無機鹽,下面跟著吱客安全網(wǎng)小編一起來看看牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的步驟有哪些吧?

    牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的步驟有哪些?

    牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基又稱為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細菌生長繁殖所需要的最基本的營養(yǎng)物質(zhì),所以可供作微生物生長繁殖之用。由于這種培養(yǎng)基多用于培養(yǎng)細菌,因此要用稀酸或稀堿將其pH調(diào)至中性或微堿性,以利于細菌的生長繁殖,下面來具體的看一下牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的步驟有哪些吧?

    1、稱量

    按培養(yǎng)基配方比例依次準確地稱取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入燒杯中。牛肉膏常用玻棒挑取,放在小燒杯或表面皿中稱量,用熱水溶化后倒入燒杯。也可放在稱量紙上,稱量后直接放入水中,這時如稍微加熱,牛肉膏便會與稱量紙分離,然后立即取出紙片。蛋白胨很易吸潮,在稱取時動作要迅速。另外,稱藥品時嚴防藥品混雜,一把牛角匙用于一種藥品,或稱取一種藥品后,洗凈、擦干,再稱取另一藥品,瓶蓋也不要蓋錯。

    2、溶化

    在上述燒杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒攪勻,然后,在石棉網(wǎng)上加熱使其溶解。待藥品完全溶解后,補充水分到所需的總體積。如果配制固體培養(yǎng)基,將稱好的瓊脂放入已溶化的藥品中,再加熱溶化,在瓊脂溶化的過程中,需不斷攪拌,以防瓊脂糊底使燒杯破裂。最后補足所失的水分。

    3、調(diào)pH

    在未調(diào)pH前,先用精密pH試紙測量培養(yǎng)基的原始pH值,如果pH偏酸,用滴管向培養(yǎng)基中逐滴加入1mol/L NaOH,邊加邊攪拌,并隨時用pH試紙測其pH值,直至pH達7.6。反之,則用1mol/L HCl進行調(diào)節(jié)。注意pH值不要調(diào)過頭,以避免回調(diào),否則,將會影響培養(yǎng)基內(nèi)各離子的濃度。對于有些要求pH值較精確的微生物,其pH的調(diào)節(jié)可用酸度計進行。

    4、過濾

    趁熱用濾紙或多層紗布過濾,以利結(jié)果的觀察。一般無特殊要求的情況下,這一步可以省去(本實驗無需過濾)。

    5、分裝

    按實驗要求,可將配制的培養(yǎng)基分裝入試管內(nèi)或三角燒瓶內(nèi)。分裝過程中注意不要使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。

    (1)液體分裝分裝高度以試管高度的1/4左右為宜。

    (2)固體分裝分裝試管,其裝量不超過管高的1/5,滅菌后制成斜面,如圖Ⅴ-2。分裝三角燒瓶的量以不超過三角燒瓶容積的一半為宜。

    (3)半固體分裝試管一般以試管高度的1/3為宜,滅菌后垂直待凝。

    6、加塞

    培養(yǎng)基分裝完畢后,在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞,以阻止外界微生物進入培養(yǎng)基內(nèi)而造成污染,并保證有良好的通氣性能(棉塞制作方法附本實驗后面)。

    7、包扎

    加塞后,將全部試管用麻繩捆扎好,再在棉塞外包一層牛皮紙,以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞,其外再用一道麻繩扎好。用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、組別、日期。三角燒瓶加塞后,外包牛皮紙,用麻繩以活結(jié)形式扎好,使用時容易解開,同樣用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、組別、日期。

    8、滅菌

    將上述培養(yǎng)基以1.05kg/cm2(15磅/英寸2),121.3℃,20分鐘高壓蒸汽滅菌。如因特殊情況不能及時滅菌,則應(yīng)放入冰箱內(nèi)暫存。

    9、擱置斜面

    將滅菌的試管培養(yǎng)基冷至50℃左右,將試管棉塞端擱在玻棒上,擱置的斜面長度以不超過試管總長的一半為宜。

    10、無菌檢查

    將滅菌的培養(yǎng)基放入37℃的溫室中培養(yǎng)24—48小時,以檢查滅菌是否徹底。

    通過吱客網(wǎng)小編的介紹,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的步驟有哪些大家都清楚了,如果大家還想了解更多關(guān)于有毒食品的知識,那就繼續(xù)瀏覽本站食品安全欄目里的內(nèi)容,才能讓家人吃上放心的食物。